作者：张玉娟,刘苗,刘培,刘娟,任琪琪,袁仕善 单位：中华预防医学会;山东省寄生虫病防治研究所 出版：《中国病原生物学杂志》2019年第06期 页数：4页  （PDF与DOC格式可能不同） PDF编号：PDFZISC2019060090 DOC编号：DOCZISC2019060099 下载格式：PDF + Word/doc 文字可复制、可编辑
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    • 目的克隆表达弓形虫主要表面抗原1截短型片段(tSAG1)，建立tSAG1纳米金免疫传感器，用于检测弓形虫抗体。方法 PCR扩增tSAG1基因片段并克隆至pMD18-T载体，测序鉴定后亚克隆至表达载体pET-28a(+)，异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达tSAG1，金属螯合层析法进行纯化，Western blot分析其免疫活性；采用种子生长法制备金纳米棒，偶联tSAG1，构建纳米金免疫传感器，用于检测人血清弓形虫抗体，计算其敏感度、特异度、阳性及阴性预测值和诊断效率。结果构建了重组表达质粒pET-28a (+)-tSAG1，表达纯化获得具有反应原性的tSAG1，其相对分子质量约为30&#215；10~3。用制备的tSAG1纳米金免疫传感器检测人血清弓形虫抗体的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值及诊断效率分别为80.9%、90.0%、90.2%、80.6%和85.2%。结论基于重组tSAG1的纳米金免疫传感器可用于弓形虫抗体的检测。

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