《重组酶聚合酶扩增结合电化学DNA传感器检测日本血吸虫方法的建立》PDF+DOC
作者:邓王平,徐斌,洪清华,王盛琳,吕超,李银龙,宋世平,陈军虎,许静,李石柱,胡薇,周晓农
单位:中华预防医学会
出版:《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》2020年第02期
页数:7页 (PDF与DOC格式可能不同)
PDF编号:PDFZJSB2020020080
DOC编号:DOCZJSB2020020089
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目的联合重组酶聚合酶扩增及电化学DNA传感器检测技术,建立一种敏感、特异且简单的日本血吸虫(Schistosoma japonicum)核酸检测方法。方法提取日本血吸虫基因组DNA,以Sj R2基因片段为靶序列,设计重组酶聚合酶扩增(RPA)引物与探针,与电化学DNA传感器(EC)检测技术联合,将探针固定于多通道电极芯片进行界面RPA扩增及电化学检测,建立日本血吸虫核酸等温检测方法。优化RPA反应条件,通过检测10~(-4)、10~(-5)、10~(-6)、10~(-7)、10~(-8)ng日本血吸虫基因组DNA,评价RPA-EC方法的敏感性;通过检测10 ng日本血吸虫、埃及血吸虫、曼氏血吸虫、卫氏并殖吸虫、大片吸虫及华支睾吸虫的基因组DNA,评价RPA-EC方法的特异性。取10只6~8周龄C57成年小鼠,每鼠经腹部贴片感染40条日本血吸虫尾蚴,分别于感染前(0 d)和感染后7、21、35 d收集尾静脉血清,验证RPA-EC方法检测感染动物动态血清DNA中Sj R2基因片段的可行性。结果RPA-EC联合检测方法可在37℃、30 min内完成SjR2基因片.....。
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