《基于生物膜干涉技术的单克隆抗体高通量定量检测方法的建立》PDF+DOC
作者:胡妍,罗安,车耀健,刘全裕
单位:福建医科大学
出版:《福建医科大学学报》2020年第03期
页数:5页 (PDF与DOC格式可能不同)
PDF编号:PDFFJYD2020030020
DOC编号:DOCFJYD2020030029
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目的运用生物膜干涉(BLI)技术,建立高通量定量检测单克隆抗体浓度的方法。方法使用Octet Red 96分子相互作用分析仪,根据样品与protein A传感器结合后光相对干涉位移变化,检测抗体浓度,并对这种检测方法进行方法学考察。结果 protein A传感器能特异性地与单克隆抗体结合,抗体工作标准品浓度在7.81~500μg/mL与结合速率呈良好的回归关系,相关系数R~2为0.999 9;检测限为0.6μg/mL,定量限为2μg/mL;回收率为98.90%~100.40%;重复性的相对标准偏差(RSD)为2.17%,中间精密度的RSD为2.52%;45 d内protein A传感器重复使用60次,阳性对照值的RSD为3.7%;再生液pH变化±;0.2、平衡液吐温-20比例变化±;5%的RSD值为0.99%。检测温度与转盘速度的变化是影响样品定量检测的因素,检测结果与高效液相数据高度一致(R~2=0.90)。结论运用BLI技术能实现高通量定量检测单克隆抗体浓度,该方法具有样品适应性强、分析速度快、准确度高的优势,可用于单克隆抗体细胞株的筛选、排序及蛋白表达的.....。
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