作者：粟莎莎,张姝,黄健,陈曦,李艳,方立超,邓钧,莫非,郑峻松 单位：贵州医科大学 出版：《贵州医科大学学报》2019年第11期 页数：6页  （PDF与DOC格式可能不同） PDF编号：PDFGYYB2019110050 DOC编号：DOCGYYB2019110059 下载格式：PDF + Word/doc 文字可复制、可编辑

    • 目的：构建一种基于5-甲基胞嘧啶(5-mC)抗体的电化学生物传感器，用于DNA多甲基化位点的定量分析。方法：采用纳米金修饰金电极(AuNPs/Au)，以自组装方式依次将单链DNA(ssDNA)、巯基己醇(MCH)和靶DNA连接到AuNPs/Au上制备DNA电化学传感器，经过电化学表征检测电极修饰效果；再以5-mC抗体特异性识别靶DNA中的甲基化位点，并以辣根过氧化物酶标记二抗(HRP-IgG)为信号示踪物，优化杂交时间及抗5-mC抗体浓度；采用差分脉冲伏安法(DPV)分别检测非甲基化与不同数量甲基化DNA的电化学信号，同时考察该方法的重复性与稳定性。结果：电化学表征结果表明电极修饰成功，优化实验条件结果显示最优杂交时间为90 min、最佳抗体浓度为10 mg/L，在该条件下DNA电化学传感器能有效区分甲基化与非甲基化DNA，并且DPV峰电流的大小与DNA甲基化位点的数量呈线性关系，具有较好的重复性与稳定性。结论：制备的DNA电化学传感器能对多个位点的DNA甲基化定量检测，有望成为临床DNA甲基化位点定量检测的有效手段。

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