作者：饶烽,崔钢华,王琰,刘伟,曹薇薇,史晨辉,王维山 单位：吉林大学 出版：《吉林大学学报(医学版)》2016年第02期 页数：5页  （PDF与DOC格式可能不同） PDF编号：PDFBQEB2016020040 DOC编号：DOCBQEB2016020049 下载格式：PDF + Word/doc 文字可复制、可编辑
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    • 目的：探讨基质金属蛋白酶3(MMP3)生物传感器载体的构建，阐明MMP3在活细胞中表达的时空信息。方法：构建定位于细胞膜表面的ECFP-MMP3-YPet生物传感器载体并进行鉴定；转染293T细胞24h后观察转染效率；加尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)刺激293T细胞，运用荧光共振能量转移(FRET)技术在共聚焦显微镜下观察MMP3生物传感器载体的荧光共振能量转移情况ECFP-MMP3-YPet biosensor。结果：成功构建ECFP-MMP3-YPet biosensor；PCR和双酶切鉴定，MMP3-YPet约780bp，转染293T细胞后MMP3生物传感器在胞质较均匀分布，转染效率约40%。uPA刺激293T细胞后，胞质和胞核内FRET比值逐渐降低，约30min时达到最小值，随后恢复正常。结论：基于FRET构建的MMP3生物传感器可以敏感而准确地监测活细胞中MMP3的表达情况。

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