作者:刘巧,欧阳南,何泉,周超 单位:第二军医大学 出版:《第二军医大学学报》2017年第12期 页数:7页  (PDF与DOC格式可能不同) PDF编号:PDFDEJD2017120070 DOC编号:DOCDEJD2017120079 下载格式:PDF + Word/doc 文字可复制、可编辑
  • 目的观察高磷环境对巨噬细胞内胆固醇蓄积的影响及其分子机制。方法将人单核细胞株(THP-1)源性巨噬细胞分为对照组(磷1.0mmol/L)、高磷处理组(磷3.0mmol/L)、磷甲酸钠(PFA)处理组(磷1.0mmol/L加PFA 1.0mmol/L)以及高磷联合PFA处理组(磷3.0mmol/L加PFA 1.0mmol/L),按不同要求分别处理各组细胞。培养24h后,油红O染色观察细胞内中性脂质的分布,酶催化比色法定量测定细胞内的胆固醇含量,qPCR检测细胞内羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGCoAR)、低密度脂蛋白受体(LDLR)、固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白(SCAP)mRNA的表达,蛋白质印迹法测定细胞内SCAP、LDLR、HMGCoAR及核内固醇调节元件结合蛋白2(N-SREBP2)的蛋白水平,激光共聚焦法检测SCAP从内质网向高尔基体的移位情况。结果与对照组相比,高磷处理组巨噬细胞内中性脂质明显聚集,细胞内总胆固醇与胆固醇酯的含量增加(P<0.05),LDLR、HMGCoAR mRNA与蛋白的表达增高(P<0.05,P<0.01),细胞核内.....。

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