作者：邓健康,牛晓娟,刘亚青,王硕 单位：中国化学会;中国科学院长春应用化学研究所 出版：《》 页数：7页  （PDF与DOC格式可能不同） PDF编号：PDFFXHX2018050180 DOC编号：DOCFXHX2018050189 下载格式：PDF + Word/doc 文字可复制、可编辑

    • 食源性致病菌严重威胁着公众健康。本研究基于荧光共振能量转移原理，以Cy3和Cy5作为荧光供体和受体基团，利用核酸外切酶Ⅲ(ExoⅢ)增强检测信号，构建了比率型荧光传感器，用于高灵敏度检测致病菌基因。分别标记有Cy3的R1-DNA和标记Cy5的R2-DNA形成双链R1/R2，在Cy3的激发光波长激发下，由于发生荧光共振能量转移，Cy3的荧光被猝灭而产生Cy5的荧光信号。致病菌靶基因(大肠杆菌Lac Z基因)的存在可将R1/R2双链解旋，使得Cy3远离Cy5，导致Cy3的荧光恢复而Cy5的荧光信号降低。在ExoⅢ作用下，Cy3与Cy5的信号变化进一步增大。在优化的实验条件下，荧光信号变化与靶基因在10~2000 pmol/L浓度范围内呈现良好的线性关系，检出限为5.29 pmol/L。所采用的比率型信号检测策略极大地降低了假阴性、假阳性检测结果的产生，增强了检测特异性。

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