《利用压电生物传感器研究核因子NF-κB与其特异结合DNA的相互作用》PDF+DOC
作者:张波,闫慧慧,蒋滢,罗阳,府伟灵
单位:中国广州分析测试中心;中国分析测试协会
出版:《分析测试学报》2009年第04期
页数:5页 (PDF与DOC格式可能不同)
PDF编号:PDFTEST2009040030
DOC编号:DOCTEST2009040039
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设计并合成了核因子NF-κB的特异结合DNA序列探针,在其5端巯基化修饰后固定在基频10 MHz的石英晶体金膜表面,构建压电DNA-蛋白质相互作用生物传感器,研究了传感器的响应特性及NF-κB的p65蛋白亚基与其特异DNA结合的亲和常数Ka。DNA探针浓度在0.25~2.0μmol/L范围内,随着探针浓度的增加,传感器的响应频率逐渐增大,当探针浓度超过2.0μmol/L时,传感器的响应频率反而降低;反应缓冲液镁离子浓度、pH对p65蛋白亚基与其特异DNA结合有影响,当MgCl2浓度为50 mmol/L、pH7.5时,p65蛋白亚基与其特异DNA结合引起的传感器响应频率最大;在p65质量浓度为10~40 mg/L时,结合反应引起的频率变化与p65质量浓度呈线性相关,检测批内相对标准偏差(RSD)小于5%,批间RSD小于10%,最大结合量和结合常数Ka分别为(49.6±;1.5)ng和(3.92±;0.14)×;106L.mol-1。构建的压电DNA-蛋白质相互作用生物传感器具有结构简单、操作方便、不需标记、实时检测等优点,可直接用于核因子NF-κB与DNA的相互作.....。
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