作者：周璐,程慧,王金娥,裴仁军 单位：中国化学会;中国科学院长春应用化学研究所 出版：《》 页数：6页  （PDF与DOC格式可能不同） PDF编号：PDFFXHX2016010040 DOC编号：DOCFXHX2016010049 下载格式：PDF + Word/doc 文字可复制、可编辑

    • 采用“分段”转化为“完整”G-四链体脱氧核糖核酸酶的策略，构建了检测多聚核苷激酶(T4 PNK)的传感器。将形成G-四链体的富G序列PS5.M序列拆分成5'和3'端均为羟基的两条链：链S_1OH和链S_2OH即分别具有12个碱基的“分段”的PS5.M。在ATP存在下，T4 PNK酶可以将链S_2OH的5'端的羟基磷酸化，转化为S_2P；在S_1OH、S_2P以及Helper链S-H存在下，T4 DNA连接酶(T4 DNA Ligase)将链S_1OH和链S_2P连接成“完整”的PS5.M序列。在体系中再加入核酸外切酶Ⅲ(ExoⅢ)，从S-H的3'端剪切S-H，释放出PS5.M。在K~+存在下，PS5.M与氯化血红素(Henfin)作用，形成具有类过氧化物酶活性的复合物，催化H_2O_2氧化2 2'-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)的反应，通过检测氧化产物在418 nm处的吸收值变化，实现对T4 PNK活性的定量检测。线性检测范围为0.02~3.0 U/mL舱出限为0.014 U/mL(S/N=3)。对Hela细胞和HEK293细胞.....。

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