作者：钟连声,齐华文,潘忠诚,马汝海,何群,姜雪,赵雨杰 单位：中国医药生物技术协会 出版：《中国医药生物技术》2011年第05期 页数：6页  （PDF与DOC格式可能不同） PDF编号：PDFZYSW2011050090 DOC编号：DOCZYSW2011050099 下载格式：PDF + Word/doc 文字可复制、可编辑
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    • 目的探讨探针和靶分子二级结构对基因芯片杂交过程的影响，并完善基因芯片设计方法，提高基因芯片的重复性和特异性。方法应用二级结构分析软件Mfold设计3对25-mer完全互补的具有不同二级结构的探针和靶分子(P0T0、P3T3、P4T4)及1对尾端有2个碱基错配的探针和靶分子(P4T3)。制备醛基化传感器芯片，将终浓度为1、2、5、10、20μmol/L的探针分别固定在芯片上，与浓度为5μmol/L的N，N′-对羧苄基吲哚三菁(Cy5)标记靶分子杂交，荧光图像扫描仪检测确定最佳杂交探针浓度；以最佳探针浓度构建芯片，分别与终浓度为0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0μmol/L的Cy5标记靶分子杂交，荧光图像扫描仪检测确定最佳杂交靶分子浓度；同时用光波导模式光谱生物传感器(OWLS)实时监测其杂交过程。以0.4%SDS和0.1%NaOH分别处理杂交后芯片10、20、30、60min，荧光图像扫描仪检测芯片再生稳定性。控制靶分子进样速度和杂交时间分别为15μl/h、7h和180μl/h、0.5h，OWLS测定杂交复合物质量、杂交效率和反应速率。结果荧光图.....。

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